细胞冻存是保存细胞的重要技术手段，它通过低温减缓细胞的生命活动，从而实现细胞的长期保存，以便在需要时复苏用于各种生物医疗实验。19世纪末，科学家首次研究低温对生物组织的影响，早期实验表明，简单冷冻会导致细胞内部冰晶的形成和渗透压失衡，从而导致细胞死亡。1937年，Luyet和Hodapp提出的“冰晶损伤”理论为这一领域的进一步研究奠定了基础。

1949年，英国科学家在研究精子冷冻的过程中，意外发现甘油能够显著提高冷冻后精子的存活率。甘油被广泛应用于细胞冻存中，作为一种渗透性冷冻保护剂（CPA），它能进入细胞内部，从而降低冰点和减少冰晶形成。此外，甘油还通过平衡细胞内外的渗透压来防止冷冻过程中细胞因脱水而破裂。

1959年，科学家发现二甲基亚砜（DMSO）在冷冻保护中同样表现出色，尤其适用于哺乳动物细胞。DMSO相比于甘油，具有更优越的细胞膜穿透能力和较低的毒性，迅速成为细胞冻存的标准保护剂之一。1963年，Peter Mazur提出了冷冻损伤的“两因素假说”，指出在快速冷冻时，细胞内冰晶形成会破坏细胞膜和细胞器，而在慢速冷冻时，细胞外冰晶的形成则会导致细胞脱水，造成化学毒性。这一理论为程序化的慢冻法提供了科学依据。

在实验过程中，大多数细胞的冻存遵循“慢速冻存”原则，采用程序降温的方式（通常为1°C/min），使细胞能够逐步脱水，避免细胞内部结冰。这一方法显著提高了冻存细胞的存活率。研究显示，5%-10%的DMSO最为适合细胞冻存，具体比例应根据细胞种类调整，对于对DMSO敏感的细胞则需减少其用量。根据经验，8%DMSO适合大多数细胞系。同时，血清的使用比例也应视细胞的培养难度而定，难以培养的细胞需要添加更多的血清，而特别脆弱的细胞可采用血清+DMSO的组合进行冻存。

我们推荐的冻存液配方为92%胎牛血清（FBS）与8%DMSO（新手推荐）或92%完全培养基与8%DMSO（高手推荐）。ag尊龙凯时提供的特级胎牛血清呈浅黄色清澈、无溶血液体，经过检测确认无菌、无支原体、无噬菌体及相关牛源病毒，低内毒素（<3EU/mL），且不含外源激素、生长因子和抗生素等，适合用于各种细胞的培养。

货号SNS-002的尚恩非程序性细胞冻存液（无血清）是一种无需经过程序降温的冻存液，可以在重悬细胞后直接置于超低温冰箱，极大地方便了冻存操作，减少了血清对细胞及实验的干扰。无论使用何种冻存液，建议在正式冻存前进行冻检：即在冻存24小时后复苏一支细胞，确认细胞状态正常后再进行大规模冻存。在冻检成功之前，至少要保留一瓶细胞培养，以防复苏失败导致细胞绝种。

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